Microscope confocal Spectral SP2 AOBS 405

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Bat 14 pièce n°12 (confocaux)
SP2

LEICA SP2 AOBS 405

microscope confocal spectral, compatible DAPI

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Designation

inverse Confocal microscope LEICA SP2 AOBS  diode 405

Model

Leica DM6 TCS SPE

3 laser DEL

488, 561, 635 nm

Objectives

10X 0.4 dry, 20X 0.7 multi-immersion, 40X 1.25 oil, 40X 0.8 water, 63X 1.2 water, 100X 1.4 oil

General informations

Motorized XY stage for precise positionning and the possibility to acquire mosaics of images
Galvanometric stage for fast and precise z-stack acquisitions
3 PMT for fluorescence, 1PMT for transmited light. Spectral analyse, FRET, FRAP, FLIP, Physiology, 3D, Multicolor, Déconvolution, Live Data Mode.

Applications

Acquisitions on cultured cells or thick tissues in fluorescence (up to 100 µm of thickness)
Acquisitions on material (in reflection mode)

Category

Photonic imaging

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Ce microscope confocal motorisé permet la visualisation de l’ensemble des sondes fluorescentes émettant dans le visible (de 400 à 700 nm, soit du DAPI à la Cy5). La diode 405 nm permet d’exciter des sondes émettant dans le proche UV. La technologie AOBS permet d’exciter des fluorochromes ayant des spectres d’excitation très proches (GFP et YFP). Son système de détection spectral (λ scan) permet d’isoler le marquage d’intérêt du bruit de fond provenant de l’autofluorescence des tissus : cependant la détection spectrale se fait de manière séquentielle et ne permet pas d’effectuer un spectre sur des marquages mobiles (type vésicules…). Le logiciel est équipé de modules permettant de réaliser des expériences de type « F techniques » telles que le FRET ou le FRAP.

 Désignation des objectifs: la rotation des objectifs est motorisée

Les objectifs sont adaptés aux études du vivant et compatibles avec la diode 405 nm. L’objectif 40X à eau (faible N.A) est particulièrement utilisé pour les études de méristèmes vivant de par sa très grande distance de travail.

Objectif

Type

O.N

imm.

lamelle

XY µm

Z µm

WDµm

Réf

10x

HC PL APO CS

0,4

dry

0,17

0.488

2,63

2200

506511

20x

HC PL APO

0,7

imm/corr

-

0.279

1,28

250

506191

40x

HCX PL APO CS

1,25

oil

0,17

0.156

0,33

100

506179

40x

HCX APO L UV I

0,8

water

0

0.244

0.82

3300

506155

63x

HCX PL APO lbd

1,2

wat/corr

0,14-0,18

0.163

0.29

220

506190

100x

HCX PL APO CS

1,4

oil

0,17

0.139

0.24

90

506038

Desigantion des cubes des filtres disponibles:
Les blocs de filtres sont utilisés pour le repérage des échantillons avant imagerie en mode confocal. La roue de filtres possède 6 positions motorisées équipée de cubes adaptés à l’observation de fluorochromes excités dans l’UV de type DAPI, de la GFP et dérivés dans le vert, DsRed, TRITC,et Texas Red dans le rouge.

N°

Domaine d'excitation / sondes

filtre d’excitation

dichroique séparateur

filtre d’arrêt

A

UV / DAPI (Long Pass)

BP 340-380

400

LP 425...

A4

UV / DAPI (Band Pass)

BP 340-380

400

BP 450-490

GFP

Bleu / GFP, FITC, YFP (Band Pass)

BP 450-490

500

BP 500-550

I3

Bleu / GFP, FITC, YFP (Long Pass)

BP 450-490

510

LP 515....

N2.1

Vert / TRITC (Long Pass)

BP 515-560

580

LP590.....

N3

Vert / DsRed, mRFP, TRITC (Band Pass)

BP 540-552

565

BP 580-620

Platine motorisée XY Märzhäuser d’un déplacement 52 x 26mm, résolution 0,025µm, précision < 6 µm et sur-platine Z à déplacement motorisé (Mosaique, Mark and Find).

- AOBS

- 3 PMTs fluorescence

- 1 PMT lumière transmise

- Détection spectrale

Station d’acquisition LCS dont les modules FRET, FRAP, FLIP, Physiology, 3D, Multicolor, Analyse spectrale, Déconvolution, Live Data Mode.

Date de modification : 03 juillet 2023 | Date de création : 14 août 2020 | Rédaction : OG