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Dernière mise à jour : Mai 2018

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UPLC-MS/MS triple quadripôle

Waters Xevo-TQ-S
UPLC Acquity I-class, couplée à un triple quadripôle Xevo TQ-S, Waters

Depuis 2012, la plate-forme dispose d'une UPLC-MS/MS, pour des analyses rapides (<15 min) et très sensibles.

Instrumentation

  • Système chromatographique

Une chaîne de chromatographie liquide ultra haute performance (UPLC I-class Waters) avec passeur automatique d’échantillons, colonne thermostatée et détecteur UV-visible à barrette de diodes

  • Sources d’ionisation du spectromètre de masse

Deux types de source fonctionnant à pression atmosphériques sont disponibles :

- Ionisation par électrospray (ESI),

- Ionisation Chimique à Pression Atmosphérique (APCI),

  • Analyseur du spectromètre de masse

Analyseur MS/MS Xevo TQ-S (Waters) (gamme de masse 0-4000 uma) permettant de réaliser différentes combinaisons de balayage en mode positif et/ou négatif :

- MS conventionnelle (spectres complets et SIR),

- MS/MS (modes Descendant, Ascendant, perte et gain de Neutres, suivi de transitions simultanées ou MRM),

- Mode automatique MS – MS/MS (mode Survey).

- Mode PICS (MS/MS balayage complet sur les pics obtenus en MRM)

- ...

Principe d'analyse :

Les différents composants de l'échantillon sont séparés par la chaîne UPLC puis introduits ensuite dans la source du spectromètre de masse. Les échantillons purs peuvent également être introduits dans la source du spectromère de masse sans séparation préalable, par injection directe ou par infusion. Les composés sont ensuite ionisés positivement ou négativement selon le mode utilisé, avant d'être transférés vers l'analyseur. Celui-ci sépare les ions suivant leur rapport masse sur charge (m/z). Plusieurs modes d'analyse sont possibles.

Applications

Les trois applications les plus courantes concernent la caractérisation structurale de molécules organiques issues du végétal, l’établissement de profils métaboliques et le dosage :

  • Détermination de masses moléculaires (nominales) par MS et caractérisation structurale par MS/MS (métabolites primaires ou secondaires de végétaux, suivi de synthèses organiques ...).
  • Elaboration de profils métaboliques (flavonoïdes, glucosinolates, caroténoïdes ...).
  • Dosage d’hormones végétales (dilution isotopique et suivi de transitions spécifiques par MS/MS mode MRM), de résidus de contaminants (étalonnage interne ou externe) …