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Dernière mise à jour : Mai 2018

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Spectromètre de masse MALDI/TOF

Spectromètre de masse MALDI/TOF
MALDI/TOF Bruker Reflex III

Théorie du spectromètre MALDI/TOF

cible

Le spectromètre MALDI/TOF (Matrix Assisted Laser Desorption Ionisation/Time Of Flight) est une technique qui n'est pas couplée à une méthode séparative contrairement aux autres technologies utilisées en spectrométrie de masse. C'est donc une technique d'analyse réservée à des molécules préalablement purifiées.

Le principe est simple:

Une matrice et un échantillon sont déposés sur une cible. Des tirs laser pulsés viennent désorber la matrice (généralement acide) qui ionise ensuite l'échantillon par transfert de charge.

Par des différences de potentiels appliquées sur des lentilles, les molécules ionisées sont accélérées puis transférées dans l'analyseur TOF. Cet analyseur va permettre la séparation des molécules ionisées qui dépendra de leur rapport masse sur charge (m/z).

Les ions de rapport m/z le plus petit arriveront en premier au détecteur, qui enregistrera un signal, sous forme d'un spectre de masse.

spectre gde taille

L'INRA de Versailles a fait l'acquisition d'un MALDI/TOF BRUKER Reflex III en 2001.

Le spectromètre est réservé à des molécules préalablement purifiées et de masse moléculaire supérieure ou égale à 1000Da.

L'analyseur TOF peut être utilisé en mode linéaire ou reflectron ; il n'existe pas de limites théoriques en masse pour cet analyseur.

Ce spectromètre offre plusieurs avantages dont la haute résolution, ce qui permet d'accéder à une mesure très exacte de la masse de la molécule (erreur < 5ppm en étalonnage interne pour une molécule de 10000 Da), et donc faciliter son identification.

Il est possible d'automatiser les analyses, et d'obtenir des informations approfondies par obtention d'ions fragments (MS/MS) grâce au mode PSD (Post Source Decay).

Applications

De nombreuses applications peuvent être envisagées avec cet instrument.

Classiquement, le domaine de prédilection du MALDI/TOF est l'identification de protéines, mais la plate-forme développe des approches plus originales comme le fingerprint enzymatique d'oligosaccharides ou encore l'analyse du mucilage de graines, posées et hydratées directement sur la cible.

Voir aussi

Paque, S., Mouille, G., Grandont, L., Alabadi, D., Gaertner, C., Goyallon, A., Muller, P., Primard-Brisset, A., Sormani, R., Blazquez, M.A., Perrot-Rechenmann, C. (2014). AUXIN BINDING PROTEIN1 Links Cell Wall Remodeling, Auxin Signaling, and Cell Expansion in Arabidopsis, Plant Cell. Published online before print January 2014, doi: http:/​/​dx.​doi.​org/​10.​1105/​tpc.​113.​120048